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1、適用范圍

本方案適用牛奶中賽拉嗪殘留量的檢測。

2、標準品配制

(1) 賽拉嗪儲備液：由迪馬科技標準品部提供，濃度100μg/mL，溶于乙腈（Cat.#:47953）；

(2) 賽拉嗪中間液Ⅰ：準確吸取適量賽拉嗪儲備液，用5%乙腈水稀釋并定容，配制成濃度為1μg/mL的中間液Ⅰ；

(3) 賽拉嗪中間液Ⅱ：準確吸取適量賽拉嗪中間液Ⅰ，用5%乙腈水稀釋并定容，配制成濃度為0.1μg/mL的中間液Ⅱ。

3、提取

取試樣2g，加8mL乙腈，渦旋混合5min，8000r/min離心5min，取上清液于10mL離心管中，40℃水浴氮吹濃縮至小于2mL，加入4mL 0.5%的氨水溶液，渦旋混合，備用。

4、凈化

ProElut^® PLS 60mg/3mL (Cat.#:68003)

(1)活化：用3mL甲醇、3mL水和3mL 0.5%氨水溶液活化；

(2)上樣：備用液全部過柱，棄去流出液；

(3)淋洗：用3mL水淋洗，真空抽干1min，棄去流出液;

(4)洗脫：加入3mL 2%甲酸甲醇洗脫，并收集洗脫液；

(5)重新溶解：將洗脫液在40℃水浴下氮吹至干，用5%乙腈水定容到0.5mL, 混勻，過Nylon膜(Cat.#:37177)，上機分析。

5、基質匹配標準溶液的制備

取經(jīng)提取、凈化、氮吹后的空白試料,加入適量標準溶液，用5%乙腈水定容到0.5mL，過Nylon膜(Cat.#:37177)，上機分析。

6、分析條件

(1) UPLC條件

色譜柱：Endeavorsil^® C18，50x2.1mm, 1.8μm (Cat.#:87002)

流速：0.3mL/min

進樣量：10μL

柱溫：35℃

流動相：A: 0.1%甲酸水溶液 B: 0.1%甲酸乙腈

梯度設置：

(2) 質譜條件

電離模式：ESI

掃描方式：正離子

掃描檢測方式：多反應監(jiān)測

電噴霧電壓：5500V霧化氣壓力：50psi

輔助氣壓力：50psi

氣簾氣壓力：20psi

離子源溫度：500℃

7、添加回收結果及譜圖