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網(wǎng)站首頁 ◇ 新聞動態(tài) ◇ 食品中蘇丹紅染料的檢測方法優(yōu)化（辣椒粉）
蘇丹紅屬偶氮系列化工合成染料，并非食品添加劑，主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四種類型。對于食品中蘇丹紅的檢測，我國曾發(fā)布 GB/T 19681-2005 食品中蘇丹紅染料的檢測方法 液相色譜法 國家標準。樣品經(jīng)溶劑提取、固相萃取凈化后，用反相液相色譜—紫外可見光檢測器進行色譜分析，采用外標法定量。
方法優(yōu)勢
辣椒粉樣品經(jīng)正己烷提取后，然后使用ProElut SDH 蘇丹紅檢測固相萃取柱進行凈化，液相色譜法檢測。該方法參考國標方法進行樣品提取，凈化過程使用商品化的蘇丹紅檢測固相萃取柱，無需按照國標方法進行層析柱的填裝和中性氧化鋁的活度調(diào)整，避免了中性氧化鋁活度容易受環(huán)境影響而引起蘇丹紅回收率不穩(wěn)定的弊端，使用ProElut SDH 蘇丹紅檢測固相萃取柱重現(xiàn)性和回收率結(jié)果更加穩(wěn)定可靠。方法檢出限是5 μg /kg，優(yōu)于國標GB/T 19681-2005要求zui低檢出限10 μg /kg。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
1、適用范圍
本方案適用于辣椒粉中蘇丹紅Ⅰ、蘇丹紅Ⅱ、蘇丹紅Ⅲ和蘇丹紅Ⅳ的檢測，方法檢出限是5 μg /kg。
2、提取
(1) 取1.0 g樣品與10 mL正己烷混合，振蕩5 min，超聲提取5 min，8000 rpm下離心2 min，收集上清液
(2) 將下層殘留物用10 mL正己烷按照步驟(1)重復(fù)提取一次，合并兩次上清液；
(3) 將上清液在40 ℃水浴條件下，減壓蒸至近干，再加入5 mL正己烷混勻，待凈化。
3、凈化——ProElut SDH 6 mL（Cat.#65909）
| a活 化： | 5 mL正己烷活化； |
| b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
| c淋 洗： | 依次加入5mL正己烷，5 mL1%乙酸乙酯正己烷，棄去流出液； |
| d洗 脫： | 加入10 mL30%乙酸乙酯正己烷，收集流出液； |
| e重新溶解： | 將洗脫液在40 ℃下減壓蒸餾近干，用40%甲基叔丁基醚正己烷溶液定容至1 mL，供HPLC分析。 |
4、色譜條件
色譜柱：Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm（Cat# 99603）
流 速：1.0 mL/min
進樣量：20 μL
柱 溫：40 ℃
檢測器：PDA 518 nm
流動相：A：0. 2% 磷酸水溶液 B：乙腈
梯度設(shè)置
| 時間/Min. | 0 | 18 | 20 | 30 | 30.1 | 40 |
| A（%） | 12 | 12 | 0 | 0 | 12 | 12 |
| B（%） | 88 | 88 | 100 | 100 | 88 | 88 |
5、添加回收結(jié)果
辣椒粉中蘇丹紅的HPLC檢測添加回收結(jié)果
| 分析物 | 添加水平(mg/kg) | 回收率(%) |
| 蘇丹紅Ⅰ | 0.5 | 90.47 |
| 蘇丹紅Ⅱ | 0.5 | 93.41 |
| 蘇丹紅Ⅲ | 0.5 | 98.51 |
| 蘇丹紅Ⅳ | 0.5 | 94.24 |
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辣椒粉中蘇丹紅染料的測定相關(guān)產(chǎn)品信息：
| 貨號 | 名稱 | 規(guī)格 |
| 樣品前處理 | ||
| 65909 | 蘇丹紅檢測固相萃取柱 ProElut SDH | 6 mL, 30/pk |
| 244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
| 4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
| 4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
| 99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
| 99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
| 37177 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
| 37180 | 針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
| 色譜柱及保護柱 | ||
| 99603 | 反相液相色譜柱 Diamonsil C18(2) | 250 × 4.6 mm，5 μm |
| 6201 | EasyGuard C18 保護柱套裝 | 10 × 4.0 1個柱套 + 2個柱芯 |
| 標準品 | ||
| 50P-C16986101 | 蘇丹紅Ⅰ[842-07-9] | 250 mg |
| 50P-C16986102 | 蘇丹紅Ⅱ[3118-97-6] | 250 mg |
| 50P-C16986103 | 蘇丹紅Ⅲ[85-86-9] | 250 mg |
| 50P-C16986104 | 蘇丹紅Ⅳ[85-83-6] | 250 mg |
| HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑 | ||
| 50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
| 50115 | 正己烷 HPLC級 | 4 L |
| 50104 | 乙酸乙酯 HPLC級 | 4 L |
| 50123 | 甲基叔丁基醚 HPLC級 | 4 L |
| 50133 | 磷酸 HPLC級 | 50 mL |
| 通用色譜產(chǎn)品 | ||
| 52401B | 瓶架/藍色 | 50 孔 |
| 52401A | 瓶架/白色 | 50孔 |
| 5323 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
| 5325 | 樣品瓶蓋/含墊（已經(jīng)組裝） | 100/pk |
| H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
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