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網(wǎng)站首頁技術支持 ◇ 紅曲米粉中桔青霉素的測定—HPLC法解決方案
紅曲米粉中桔青霉素的測定—HPLC法解決方案
  • 更新日期:2016-09-09     信息來源:本站      瀏覽次數(shù):4963
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      紅曲米粉是指以大米為原料,用紅曲菌屬(Monascus spp)紅曲霉發(fā)酵培養(yǎng)制得,具有紅色的顆粒或用其制成的粉末。目前紅曲可分為色曲、酒曲和功能性紅曲。在紅曲霉的發(fā)酵過程中,同時與紅曲色素相伴產生一種有害的次級代謝產物--桔青霉素。研究表明桔青霉素具有腎毒性,可致畸、致癌和誘發(fā)基因突變。桔青霉素的存在,制約了紅曲在食品及藥品方面的廣泛應用,在一定程度上阻礙了紅曲產業(yè)的發(fā)展。

      目前紅曲米粉中桔青霉素檢測難點是凈化效果差,影響目標物的定性與定量。

      方法優(yōu)勢:

      迪馬科技依照國標《QB/T 2847-2007 功能性紅曲米(粉)》中樣品預處理方法及HPLC條件,配合使用固相萃取柱進行凈化,建立了紅曲米粉中桔青霉素的測定方法,該方法:

      1. 采用95%甲醇水超聲提取,濃縮經(jīng)混合型強陰離子交換柱凈化,運用HPLC-FLD測定;

      2. 本方法定量限是10 μg/kg,回收率達90%以上,保證實驗結果的準確性、重現(xiàn)性;

      3. 本方案具有前處理簡單,回收率高,除雜效果明顯、方法重現(xiàn)性好等優(yōu)點;

      4. 適用于各省市出入境、質檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構、大型食品生產商、高校和科研院所等。

      以下為詳細解決方案,敬請參考!

      紅曲米粉中桔青霉素的測定—HPLC法

      1、適用范圍

      本方案適用于紅曲米粉中桔青霉素的檢測,方法定量限是10 μg/kg。

      2、提取

      1. 1.0 g樣品,加入10 mL 95%甲醇水溶液,混勻,超聲10 min,間隔振蕩,6000 rpm離心2 min,取上清液;

      2. 向下層殘渣中加入8 mL 95%甲醇水溶液,混勻,超聲10 min,間隔振蕩,6000 rpm離心2 min,合并上清液;

      3. 將上清液在35 ℃水浴下減壓蒸餾至剩水,加入2 mL甲醇,超聲溶解,6000 rpm離心1 min,取上清液,待凈化。

      3、凈化——ProElut PXA 60 mg/3 mL(Cat#:68303)

      a活    化:

      加入3 mL甲醇活化;

      b上    樣:

      加入待凈化液,棄去流出液;

      c淋    洗:

      加入3 mL 5%甲酸甲醇溶液,棄去流出液;

      d洗    脫:

      加入2 mL 0.2 M鹽酸甲醇溶液,收集流出液,供HPLC分析。

      4、色譜條件

      色譜柱:Platisil ODS,150 x 4.6 mm,5 μm(Cat#:99501)

      流  速:1.0 mL/min    進樣量:20 μL   柱  溫:28 ℃

      檢測器:FLD,Ex:331 nm;Em:500 nm

      流動相:A:1% 磷酸水溶液    B:乙腈     A:B=57:43

      5、添加回收結果

      紅曲米粉中桔青霉素的HPLC檢測添加回收結果

      樣品

      添加水平(mg/kg)

      回收率(%)

      紅曲米粉

      0.05

      97.53

      0.20

      97.23

      桔青霉素標準品(0.025 mg L)液相色譜圖.jpg

      桔青霉素標準品(0.025 mg/L)液相色譜圖

      桔青霉素標準品(0.1 mg L)液相色譜圖.jpg

       

      桔青霉素標準品(0.1 mg/L)液相色譜圖

      添加水平為0.05 mg/kg紅曲米粉中桔青霉素檢測液相色譜圖

      添加水平為0.20 mg/kg紅曲米粉中桔青霉素檢測液相色譜圖

      紅曲米粉中桔青霉素檢測(空白樣品)的液相色譜圖

       

      紅曲米粉中桔青霉素的測定—HPLC法相關產品信息:

      貨號

      名稱

      規(guī)格

      樣品前處理

      68303

      ProElut PXA

      60 mg/3 mL, 50/pk

      244358

      12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

      12位

      4803

      1,3,6mL柱管通用連接器

      15/pk

      4806

      考克(控制流量)

      15/pk

      99011

      真空/正壓兩用泵,無油

      1/pk

      99013

      抽濾瓶套裝

      (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)

      1/pk

      30039

      FitMax針頭式過濾器 Nylon

      13 mm,0.22 μm 100/pk

      30040

      FitMax針頭式過濾器 Nylon

      13 mm,0.45 μm 100/pk

      標準品

      50D-22958-5MG

      桔青霉素[518-75-2]

      5   mg

      色譜柱及保護柱

      99501

      Platisil ODS 寬pH范圍型反相色譜柱

      150 x 4.6 mm,5 μm

      HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑

      50144

      甲酸  HPLC級

      50 mL

      50101

      乙腈  HPLC級

      4 L

      50102

      甲醇  HPLC級

      4 L

      50133

      磷酸  HPLC級

      50   mL

      通用色譜產品

      52401B

      瓶架/藍色(現(xiàn)貨)

      50孔

      52401A

      瓶架/白色(現(xiàn)貨)

      50孔

      1034

      樣品瓶(棕色/螺紋)

      2 mL, 100/pk

      1035

      樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

      100/pk

      H80465

      HPLC 進樣針

      25 μL

      紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*

       

    北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)

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